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      Elastin 彈性蛋白/膠原酶是應用非常廣泛的消化劑

      更新時間:2022-11-23點擊次數:2549
        Elastin 彈性蛋白/膠原酶是廣泛應用的消化劑,胰蛋白酶是一種胰臟制品,對蛋白質有水介作用,主要作用于賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細胞間質中的蛋白質水介而使細胞分散開,在常用的蛋白酶中由于產品的活力和純度不同,對細胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對細胞的作用,取決于細胞類型、酶的活力、配制的濃度、消化的溫度、無機鹽離子、pH以及消化時間的長短等。
       
        是一種從細菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質有較好的消化作用,對細胞本身影響不大,可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害,該酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養(yǎng)液配制,即操作簡便又可提高細胞成活率,濃度200u/mL或0,0,3mg/mL,此酶消化作用緩和,無需機械振蕩,但膠原酶價格較高,大量使用將增加實驗成本。
       
        Elastin 彈性蛋白/膠原酶的具體操作方法如下:
       
        ①在剪斷連接嬰兒端和母親的臍帶后,立刻用臍帶夾夾住,防止內部污染。裝入無菌袋(容器)中,送進實驗室。
       
        ②在生物安全柜或超凈工作臺內,取出臍帶,連同臍帶夾用75%的酒精泡2min(50ml離心管或250px皿)。如果臍帶較長,無法裝入容器,可以把臍帶剪成250px左右,但是剪斷之前一定要用臍帶夾加好,防止酒精進入臍帶內部,損傷細胞。
       
        ③用酒精處理完,迅速移入裝有PBS或生理鹽水的容器中浸泡清洗2次,每次2min即可。
       
        ④剪掉臍帶夾,把臍帶剪成2-75px段,用剪刀從臍靜脈內側剖開臍帶,用帶齒鑷子(臍帶組織比較滑,用帶齒鑷子好操作)把臍靜脈、臍動脈以及臍帶包膜去除,防止雜細胞混入。
       
        ⑤用剪刀剪碎臍帶組織,0,1%Ⅱ型膠原酶(稀釋液用DMEM/F12)過夜消化,4℃過夜消化。
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