細胞轉染的分類

　　細胞轉染是指將外源性基因導入到細胞內的技術。那你知道細胞轉染是如何分類的嗎？讓我們一起來看看吧！
 

　　一、根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短，可分為瞬時轉染和穩定轉染。
 

　　瞬時轉染(transient transfection)：指將精心構建的質粒通過一定方式導入哺乳動物細胞內，其中所攜帶的外源基因不與細胞內基因組整合。
 

　　細胞中外源基因的瞬時轉染表達時間有限，通常僅持續數日，直至外源基因由于細胞分裂過程中的各種因素而喪失。此方法常用于啟動子和其他調控元件的研究。
 

　　目前，憑借多種轉染試劑的創新，已能在哺乳動物細胞中實現瞬時轉染，以生產具有適當折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。
 

　　穩定轉染(Stable transfected)：外源DNA被整合到細胞基因組中或作為附加質粒保留在細胞內。與瞬時轉染不同，穩定轉染能夠與宿主基因組整合，因此轉染細胞及其后代細胞的基因組中同時保留了轉染的DNA。
 

　　由于穩定轉染效率較低，因此選擇有效的轉染策略和篩選方法至關重要。
 

　　二、根據轉染方式可分為化學、生物和物理方法。
 

　　細胞由帶有負電荷的磷脂雙分子層構成，對于大分子物質而言，其形成了不可透過的屏障，例如DNA和RNA的磷酸骨架，它們也帶有負電荷。為了讓核酸穿過細胞膜，研究人員開發了多種技術，大致分為三類：
 

　　化學方法：利用載體分子包裹核酸，使其呈現中性電荷或正電荷。例如陽離子脂質體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽離子物質介導等技術。
 

　　生物方法：利用基因工程病毒將非病毒基因轉染至細胞中。目前較常見的是各種病毒介導的轉染技術。
 

　　物理方法：通過在細胞膜表面產生瞬時的孔道，導入DNA。例如電穿孔法、顯微注射法。
 

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