takara一步法RT-qPCR說明書

更新時間：2024-12-11

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一、產品目錄表

一步法RT-qPCR探針法檢測試劑盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

品牌	Code No.	產品名稱	包裝量	價格（元）
Takara	RR600A	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 Rxns	詳詢
Takara	RR600B (A × 5)	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 Rxns × 5	詳詢
Takara	RR601A	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG	200 Rxns	詳詢
Takara	RR601B (A × 5)	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG	200 Rxns × 5	詳詢

二、產品特點

· wan全premix型、操作簡單、probe法One Step RT-qPCR。
· zuo越的抗反應阻礙物能力、粗提樣品可以使用本產品
· 新增UNG版本，可防止假陽性產生

■ 制品內容

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A，200次，25 μl反應體系)

1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix（2×）	625 μl × 4
2. RNase Free Water	1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye（50×conc.）*	100 μl
4. ROX Reference Dye II（50×conc.）*	100 μl

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A，200次，25 μl反應體系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG（2×）	625 μl × 4
2. RNase Free Water	1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye（50×conc.）*	100 μl
4. ROX Reference Dye II（50×conc.）*	100 μl

* 使用Applied Biosystems Real-Time PCR儀器等，需要進行孔與孔之間的熒光信號校正時添加該試劑。

◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的儀器 Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的儀器 Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的儀器 Thermal Cycler Dice Real Time System系列 LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics) CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)

■ 制品說明

反應阻害物耐受實驗

圖1．阻害物耐受實驗

在反應液中添加5種反應阻害物，分別使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix、Takara以往產品及其他公司的產品進行阻害物質耐受實驗。結果表明，使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對添加各種阻害物質和無添加組比較，Ct值之間的差值很小，顯示該制品對于各種阻害物具有很高的耐受性。

target	Human ACTB基因
探針	Takara qPCR Probe

圖2．Multiplex反應的再現性

以Human HeLa Cell Total RNA 1 pg～100 ng為模板，使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對ACTB、GAPDH、PPIA、YWHAZ基因進行multiplex表達分析。對于所有目標序列，滿足R2＞0.99。

Standard

- Actin E = 97.1％ R2= 0.996 Slope=-3.393 y-int=33.278

- YWHAZ E = 95.6％ R2= 0.997 Slope=-3.433 y-int=35.528

- GAPDH E = 100.6％ R2= 1.000 Slope=-3.307 y-int=35.400

- PPIA E = 97.1％ R2= 0.999 Slope=-3.395 y-int=33.800

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