alzet微量滲透泵操作方法

　　一、alzet微量滲透泵操作第一階段：實驗設計與準備（術前1-2天）
 

　　選擇泵型號：根據實驗持續時間(如2周選1002，4周選1004)和所需流速選擇。

 

　　計算藥物濃度：
 

　　緩釋泵藥物濃度計算要根據每天給藥量以及緩釋泵的泵送速率這兩個參數來計算給藥濃度，其中每天給藥劑量可根據事先查閱文獻確定。
 

　　此外，每批次緩釋泵的泵送速率會貼在包裝盒上，需要按照包裝上的速率進行配藥。
 

　　濃度計算舉例：2001滲透泵，給藥：抗利尿激素 (ADH)，
 

　　1.查閱文獻發現，大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只，或1.25ng/小時/只。然后，計算出完成1.25ng/小時 所需輸注量所需的ADH濃度：
 

　　ko = Q • Cd
 

　　其中 ko (µg/hr) 是質量輸送速率，Cd (µg/µl) 表示藥物溶液濃度，Q (µl/hr) 表示泵的泵送速率。
 

　　2.2001型泵的 (標稱) 泵送速率為 1 µl/hr (Q)，因此所需濃度 (Cd) 為：
 

　　Cd = 1.25 ng/hr = 1.25 ng/µl = 1.25 x 10-3 µg/µl
 

　　1 µl/hr
 

　　3. 2001型泵儲液體積(標稱) 為 200 µl。為了達到所需的 1.25 x 10-3 µg/µl 濃度，應在 200 µl 中溶解的 ADH 量為：
 

　　m=c • v
 

　　(1.25 x 10-3 µg/µl) x 200 µl = 0.25 µg
 

　　綜上，為了模擬大鼠正常的 ADH 分泌量30 ng/天/只(或 1.25 ng/小時/只)，必須在溶液中配制濃度為 1.25 x 10-3 µg/µl 的 ADH 溶液。應配制過量溶液，以保證泵填充期間的安全裕度。
 

　　二、alzet微量滲透泵操作第二階段：泵的填充與平衡（手術當天，關鍵步驟）
 

　　填充泵：
 

　　在超凈臺內操作。將泵的流量調節器朝上，用提供的專用填充管連接注射器。
 

　　將注射器針頭垂直插入填充管，緩慢平穩地推動活塞，直到藥液從流量調節器末端流出1小滴。這確保了藥液充滿儲藥庫并排盡所有氣泡。

 

　　移開注射器，泵已準備好。
 

　　注意：切勿先安裝流量調節器！必須先填充。
 

　　平衡(啟動泵，至關重要！)：
 

　　將填充好的泵立即放入一個裝有無菌生理鹽水的無菌離心管中。
 

　　將管子放入 37°C 培養箱中，平衡至少4-6小時(可過夜，不超過推薦時長)。
 

　　目的：讓泵在植入前就開始滲透過程，確保植入動物體內后能立即以恒定速率給藥。跳過此步會導致初始24-48小時無給藥或速率不準。
 

　　三、alzet微量滲透泵操作第三階段：動物手術植入
 

　　麻醉與備皮：對動物(小鼠/大鼠)進行麻醉，剃除背部肩胛骨間的毛發，并進行外科消毒。
 

　　制作皮下囊袋：
 

　　在背部中線皮膚上做一個約1cm(小鼠)或1.5cm(大鼠) 的小切口。
 

　　用鈍頭剪或止血鉗，從切口向動物頭部方向輕柔地分離皮下組織，形成一個足以容納泵的囊袋。
 

　　植入泵：
 

　　用無菌鑷子從平衡液中取出泵，用無菌紗布輕輕吸干表面液體。
 

　　將泵的流量調節器端朝向動物頭部，平滑地滑入囊袋深處。
 

　　注意方向：確保泵在囊袋內可以自由移動，不受皮膚張力擠壓。
 

　　縫合：使用可吸收縫線或皮膚夾閉合皮膚切口。無需縫合囊袋。
 

　　術后護理：將動物置于溫暖墊料上單籠飼養，直至清醒，并監測其恢復情況。
 

　　四、alzet微量滲透泵操作第四階段：可選步驟——導管連接（用于腦室、血管或局部給藥）
 

　　如果需要靶向給藥，需在泵和靶點之間連接導管。

 

　　連接導管：將導管的一端緊密套在泵的流量調節器出口上。
 

　　排氣：用注射器向導管內注入少量無菌生理鹽水，排盡導管和接頭內的所有氣泡。
 

　　植入與固定：將導管另一端植入目標位置(如側腦室、靜脈)，并用顱骨螺釘(腦部)或組織膠(皮下)妥善固定導管。最后將泵按上述方法植入皮下。
 

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