Zymo 質粒中提/大提試劑盒該如何使用？

　　Zymo 質粒中提/大提試劑盒采用硅膠模吸附技術，專一地結合質粒DNA。同時采用特殊的溶液P4和過濾器CS1，可有效的出去內毒素、蛋白質雜志；整個提取過程僅需1h，方便快捷。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規操作，包括酶切、PCR、測序、連接、轉化和細胞轉染多種細胞等試驗。推薦每次菌液使用量：高拷貝質粒推薦使用量為100ml，得率一般在500-1500ug左右；低拷貝質粒推薦使用量為200ml，得率一般在200-600ug左右。
 

　　Zymo 質粒中提/大提試劑盒注意事項：請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
 

　　1.溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入)，混勻，置于2-8℃保存。
 

　　2.使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在漂洗液PW中加入無水乙醇。
 

　　3.使用前先檢查平衡液BL，溶液P2和P4是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀現象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復澄清。
 

　　4.注意不要直接接觸溶液P2和P4，使用后應立即蓋緊蓋子。
 

　　5.使用過濾器時請將推柄小心緩慢地從過濾管中抽出，避免濾膜因壓力而松動。
 

　　6.提取的質粒量與細菌培養濃度，質粒拷貝數等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb的大質粒，應加大菌體使用量，同時按比例增加P1、P2、P4的用量；洗脫緩沖液推薦在65-70℃水浴中預熱，可以適當延長吸附和洗脫時間，以提高提取效率。
 

　　7.實驗前使用平衡液BL處理吸附柱，可以激活硅基質膜，提高得率。
 

　　8.用平衡液處理過的柱子建議立即使用，放置時間過長會影響使用效果。