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產(chǎn)品簡介
百奧益康蛾腸道組織解離試劑盒適用于蛾腸道組織細胞懸液的分離制備，本產(chǎn)品利用酶溫和、快速有效地破壞細胞外基質(zhì)，釋放細胞，從而生成單細胞懸浮液。
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一、產(chǎn)品簡介
百奧益康蛾腸道組織解離試劑盒，本產(chǎn)品適用于蛾腸道組織細胞懸液的分離制備，本產(chǎn)品利用酶溫和、快速有效地破壞細胞外 基質(zhì)，釋放細胞，從而生成單細胞懸浮液。制備的單細胞懸液可用于細胞分選、細胞培養(yǎng)或 其他細胞相關(guān)檢測。
保存條件-20℃保存，有效期兩年。
二、注意事項
1. 離心機務(wù)必使用水平離心機，并設(shè)置合適的參數(shù)，避免因操作不當影響實驗結(jié)果。
2. 本產(chǎn)品為無菌產(chǎn)品，請穿實驗服并佩戴一次性手套，注意無菌操作，避免微生物污染。
3. 使用前需確保試劑wanquan融化并混勻。 4. 昆蟲細胞較脆弱，顛倒及吹打操作應(yīng)輕柔，吸取及吹打細胞盡量使用擴口槍頭。 自備材料 1. 儀器：水浴鍋（定時手動搖晃混勻）或雜交爐（轉(zhuǎn)速20~30轉(zhuǎn)/分鐘）、水平離心機。 2. 試劑：D-Hanks 緩沖液（不含鈣鎂）、FBS。 3. 耗材：低吸附槍頭、5mL和15mL離心管、40μm細胞篩。
4. 消化：具體消化時間根據(jù)物種與組織量不同靈活調(diào)整。
三、使用方法
準備工作：水浴鍋或雜交爐設(shè)置到28℃、配制含4%FBS的D-Hanks。 切取10~15只新鮮蛾腸道組織。
取一個5mL離心管，加入3mL蛾腸道組織解離液。
將組織樣本用4%FBS的D-Hanks清洗干凈，在少量（約40µL）蛾腸道組織解離液中充 分剪碎，并轉(zhuǎn)移到第1步準備好的溶液中，顛倒混勻。
放在28℃水浴鍋或雜交爐中消化25~35min。消化過程中，使用水浴鍋每隔3~5min 手動吹打搖晃混勻，使用雜交爐轉(zhuǎn)速20~30轉(zhuǎn)/分鐘左右。
每隔5min質(zhì)檢一次細胞懸液，根據(jù)細胞總量及活性等確定消化終止時間。
消化完成后，用40μm細胞篩過濾細胞懸液，收集濾液于15mL離心管中。
使用6mL4%FBS的D-Hanks涮洗消化管管壁，涮洗液經(jīng)過同一個40μm細胞篩進行過 濾，收集濾液于第5步的15mL離心管中，共9mL。
將收集液于4℃，300×g離心5min，棄上清。
用50µL~1mL4%FBS的D-Hanks重懸沉淀，根據(jù)所需的細胞濃度調(diào)整重懸液的體積。
（可選擇步驟）可再加入4mL4%FBS的D-Hanks并混勻，4℃，300×g離心5min，棄 上清，加入適當體積4%FBS的D-Hanks重懸沉淀（細胞數(shù)會有損失）。
百奧益康蛾腸道組織解離試劑盒——天津益元利康生物科技有限公司
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